اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹکس ایک گرام مثبت کوگولیس-منفی جراثیم ہے جو اسپتالوں میں بہت عام ہے۔ حالیہ برسوں میں ، اسپتال سے حاصل ہونے والے انفیکشن کے زیادہ خطرہ کی وجہ سے تشویش میں اضافہ ہوا ہے۔ اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹکس جلد کے انفیکشن ، میننجائٹس ، پیریٹونائٹس ، اور یہاں تک کہ سیپسس کا سبب بن سکتا ہے۔ کلینیکل تشخیص میں تاخیر صحت کی حالتوں میں بگاڑ کا باعث بن سکتی ہے ، لہذا اسٹیفیلوکوکس ہیمولوٹکس کی تیز رفتار تشخیص عین مطابق علاج کی کلید ہے۔
لیانونگنگ سیکنڈ پیپلس اسپتال کے سینٹرل لیبارٹری کے محکمہ کے پروفیسر جی توو کے ریسرچ گروپ نے ایک مضمون شائع کیا "ایم آر اے-ایل ایف ایس کے ساتھ کلینیکل نمونوں میں اسٹافیلوکوکس ہیمولیٹکس کا ایک تیز اور بصری پتہ لگانا" جرنل "اینالٹیکا چمیکا ایکٹا" میں ، جس کا اثر 6.2 کا اثر ہے۔
مطالعہ کا جائزہ
اس مطالعے میں ، پروفیسر جی ٹوو کے گروپ نے ایم وی اے اے جین پر مبنی میرا-ایل ایف ایس کے ذریعہ اسٹیفیلولوٹیکس ہیمولیٹکس کی کھوج کے لئے ایک طریقہ قائم کیا ، اور تیز رفتار روگجن کی کھوج کو حاصل کرنے کے لئے پس منظر کے بہاؤ ٹیسٹ کی پٹی ایل ایف ایس کے ساتھ مل کر ملٹی انزائم مستقل درجہ حرارت ریپڈ نیوکلیک ایسڈ امپلیفیکیشن ٹکنالوجی میرا استعمال کیا۔ یہ تجربہ 37 ڈگری پر انجام دیا گیا تھا اور نتائج 9 منٹ کے اندر اندر پائے گئے تھے جس کا پتہ لگانے کی حساسیت 0. 147 CFU/رد عمل کی نشاندہی کی گئی تھی۔ MIRA-LFS کا پتہ لگانے کا طریقہ کلینیکل نمونوں میں اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹکس کی طے شدہ نکاتی پتہ لگانے کے لئے موزوں ہے ، اور پی او سی ٹی کے ذریعہ اسٹیفیلوکوکس ہیمولوٹکس کی شناخت کے طریقہ کار کو محسوس کرتا ہے ، جو کم علاقوں میں بیماریوں کی تیز رفتار تشخیص اور علاج کے ل great بڑی قدر کا حامل ہے۔ ریسرچ گروپ نے 95 بے ترتیب کلینیکل نمونوں کا تجزیہ کرنے کے لئے میرا ایل ایف ایس ، کیو پی سی آر اور روایتی بیکٹیریل ثقافت کے طریقوں کا استعمال کیا ، اور کلینیکل اطلاق کی تصدیق کی۔
تحقیق کے طریقے
MIRA-LFS ٹیسٹ کا ایک اسکیمیٹک ڈایاگرام اوپر دکھایا گیا ہے۔ اس مطالعے میں ، AMPFUVER BIOTECH کا DNA مستقل درجہ حرارت ریپڈیمیفیکیشن کٹ (کولائیڈیل سونے کی جانچ کی پٹی کی قسم) اور نیوکلیک ایسڈ کا پتہ لگانے کی جانچ کی پٹی استعمال کی گئی تھی۔
ایم وی اے اے جین کی پرائمر لمبائی 30-35 نیوکلیوٹائڈس تھی ، اور پروردن کی مصنوعات کی لمبائی 100-350 بی پی تھی ، اور امیدوار پرائمر کے کل 6 جوڑے تیار کیے گئے تھے۔ معیاری اسٹیفیلولوٹک اسٹیفیلوکوکس تناؤ کے جی ڈی این اے کو ایم آئی آر اے تجزیہ کے لئے استعمال کیا گیا ، امیدوار پرائمر اسکرین کیے گئے ، اور ایمپائیفائڈ مصنوعات کو 2 ٪ ایگروز جیل الیکٹروفورسس نے تصور کیا۔
۔
اس کے بعد تحقیقات کو فارورڈ پرائمر تسلسل (16 بی پی پسماندہ) کے مطابق ڈیزائن کیا گیا ہے۔ تحقیقات کے 5 'اختتام پر ایف آئی ٹی سی کے ساتھ لیبل لگا ہوا ہے اور 3' اختتام پر سی 3 کا لیبل لگا ہوا ہے۔ تحقیقات میں 31- پوزیشن نیوکلیوٹائڈ کو 5 'اختتام سے 30 بی پی کے فاصلے پر اور 3' اختتام سے 15 بی پی کے فاصلے پر ٹی ایچ ایف کے ساتھ تبدیل کیا گیا ہے۔ منتخب کردہ ریورس پرائمر کے 5 'اختتام پر بایوٹین کے ساتھ لیبل لگا ہوا ہے۔
۔
اس کے علاوہ ، اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹکس کے ذریعہ MIRA-LFs کی کھوج کے لئے رد عمل کی شرائط کو بہتر بنایا گیا۔ ٹیسٹ 2 منٹ کے وقفوں پر 4-12 منٹ سے 37 ڈگری پر انجام دیئے جاتے ہیں۔ نتائج 8 منٹ کے رد عمل کے وقت میں دکھائے گئے ہیں ، اور ٹیسٹ لائن واضح طور پر دکھائی دیتی ہے۔ اس کے علاوہ ، ٹیسٹ 22-52 ڈگری سے 5 ڈگری کے وقفوں پر کیا جاتا ہے۔ ma {7}} ڈگری MIRA-LFS کا پتہ لگانے کے لئے سب سے موزوں درجہ حرارت ہے۔ لہذا ، اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹکس کے لئے MIRA-LFS کے طریقہ کار کا زیادہ سے زیادہ رد عمل کا وقت اور درجہ حرارت بالترتیب 8 منٹ اور 37 ڈگری تھا۔ اس حقیقت کے ساتھ کہ حتمی نتیجہ 1 منٹ کے اندر اندر ایل ایف ایس کے ذریعہ تصور کیا جاتا ہے ، اس کا پتہ لگانے کا کل وقت 9 منٹ ہے۔
(رد عمل کے وقت اور درجہ حرارت کی اصلاح)
تجرباتی نتائج
1. حساسیت کی توثیق
جینومک ڈی این اے (جی ڈی این اے) کی مختلف حراستی اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹیکا ثقافتوں (1 0^6-10^0 CFU/ml) کے سیریل ڈیلوشنز سے حاصل کی گئی تھی جس کا تجربہ میرا-ایل ایف ایس کے لئے کیا گیا تھا۔
(مختلف حراستی میں مثبت سگنل)
امکانی یونٹ رجعت تجزیہ سے پتہ چلتا ہے کہ میرا-ایل ایف ایس پرکھ کے ذریعہ طے شدہ 95 ٪ ایل او ڈی 0. 147CFU/رد عمل تھا۔
(پتہ لگانے کے حساب کتاب کی حد)
2. مخصوصیت کی توثیق
MIRA-LFS کا پتہ لگانے کی انتخابی صلاحیت کا تعین عام روگجنک مائکروجنزموں کے 18 تناؤ اور کلینیکل اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹکس کے 15 تناؤ کا تجزیہ کرکے کیا گیا تھا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ MIRA-LFS ٹیسٹ تمام 18 دیگر روگجنک بیکٹیریا کے لئے منفی تھا ، اور اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹکس کے 15 تصدیق شدہ کلینیکل نمونوں کے لئے مثبت تھا۔
(معیاری روگجنک بیکٹیریا کے 8 تناؤ اور کلینیکل ہیمولٹک اسٹریپٹوکوکس کے 15 تناؤ کا بالترتیب تجربہ کیا گیا)
میرا-ایل ایف ایس پرکھ میں اعلی انتخاب ہے اور وہ اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹکس کی اسکریننگ کے لئے موزوں ہے۔
3. اصل نمونہ کی جانچ
لیانونگنگ سیکنڈ پیپلس اسپتال سے تصادفی طور پر 95 نمونے جمع کیے گئے تھے ، جن میں جلد اور نرم بافتوں کے 35 نمونے ، پیشاب کے 16 نمونے ، تھوک کے 14 نمونے اور خون کے 30 نمونے شامل ہیں۔
(95 کلینیکل نمونوں کا تجربہ مختلف طریقوں سے کیا گیا)
نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ پتہ لگانے کا طریقہ کیو پی سی آر کے طریقہ کار کے مطابق 100 ٪ مطابقت رکھتا ہے۔ اس کے علاوہ ، سونے کے معیار (جی بی/ٹی 4789۔ 11-2003) کے مقابلے میں ، اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹیکا انفیکشن کی نشاندہی کے لئے بالترتیب 100 ٪ اور 98.73 ٪ تھے۔ ان نتائج سے کلینیکل نمونوں میں اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹکس کی کھوج میں طریقہ کار کی تکنیکی فزیبلٹی کی مزید توثیق ہوتی ہے۔
پی آئی سی ٹی کے ذریعہ اسٹیفیلوکوکس ہیمولیٹکس کی تیزی سے پتہ لگانے کے لئے میرا ایل ایف ایس کا طریقہ استعمال کیا جاتا ہے ، جو موثر ، درست ، آسان اور لاگت سے موثر ہے ، جو تیزی سے تشخیص اور علاج کے فیصلوں کے لئے مددگار ہے۔