شدید سانس کے انفیکشن بچوں میں سانس کی عام بیماریاں ہیں ، جو اکثر وائرس کی وجہ سے ہوتے ہیں۔ سانس کی سنسنی خیز وائرس (آر ایس وی) اور سانس کی اڈینو وائرس (ایڈ) دو عام روگجن ہیں جو بچوں میں شدید سانس کے انفیکشن کا سبب بنتے ہیں۔ ہلکے معاملات عام طور پر سردی کی علامات جیسے کھانسی اور بہتی ناک کا سبب بن سکتے ہیں ، جبکہ شدید معاملات نمونیا اور اوٹائٹس میڈیا جیسی شدید پیچیدگیوں کا سبب بن سکتے ہیں۔ عالمی ادارہ صحت کی سفارشات کے مطابق ، پیتھوجینز کی کھوج کو تیز ، درست ، حساس اور مخصوص ہونے کی ضرورت ہے اور اسے خصوصی تکنیکی ماہرین یا بڑے آلات پر انحصار نہیں کرنا چاہئے۔ لہذا ، یہ خاص طور پر اہم ہے کہ آر ایس وی اور ایڈ کے لئے پتہ لگانے کا طریقہ تیار کیا جائے جو مذکورہ بالا پتہ لگانے کی ضروریات کو پورا کرسکے۔
شینزین چلڈرن اسپتال کے انسٹی ٹیوٹ آف پیڈیاٹرکس کے ڈائریکٹر ما ڈونگلی کے ریسرچ گروپ نے ایک مضمون شائع کیا "ایک ملٹی پلیکس ریکومبینیس پولیمریز پروردن اسسے کے ساتھ مل کر سی آر آئی ایس پی آر/ سی اے ایس 12 اے کے ساتھ مل کر سانس کی سنسنی خیز وائرس اور سانس لینے کے اڈینو وائرس کا پتہ لگانے کے لئے" سائنسی رپورٹوں میں "سائنسی رپورٹوں کے ساتھ۔
تحقیق کا جائزہ
ملٹی انزائم آئسوڈرمل ریپڈ نیوکلیک ایسڈ امپلیفیکیشن ٹکنالوجی میرا کو CRISPR/CAS کا پتہ لگانے کے نظام کے ساتھ ملایا گیا ہے۔ MIRA پرائمر اور CRISPR RNAs (CRRNAs) کو ڈیزائن کرکے ، ایک سے زیادہ ترتیب موازنہ انجام دے کر ، رد عمل کے حالات کو بہتر بناتے ہوئے ، اور حساسیت اور وضاحت کی تصدیق کے ل flu فلوروسینس عددی پتہ لگانے والے آلات کا استعمال کرتے ہوئے۔
اور کیو پی سی آر کے نتائج کو موازنہ کنٹرول کے طور پر استعمال کرتے ہوئے ، 160 کلینیکل گلے جھاڑو کے نمونوں کے ٹیسٹ کے نتائج کی مستقل مزاجی کا مطالعہ کیا گیا۔
تجرباتی نتائج
1. MIRA-CISPR/CAS12A کا پتہ لگانے کے طریقہ کار کی حساسیت اور خصوصیت
میرا طریقہ کار کی کھوج میں ، RSV-F1/R1 پرائمر جوڑی RSV ، ADV ، PIV ، RHV ، MP ، CP ، FLUB ، HMPV ، FLUA ، یا RSSV/ADV کے شریک متاثرہ مریضوں کے گلے کی جھاڑی کے نمونوں سے نیوکلیک ایسڈ کو بڑھانے کے لئے استعمال کی جاتی ہے۔ آر ایس وی اور ایڈ کے علاوہ ، جس میں بینڈز کو بڑھاوا دیا گیا تھا ، دوسرے نتائج منفی تھے ، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ منتخب شدہ میرا پرائمر نے ٹیسٹ کیے گئے دیگر آٹھ پیتھوجینز کے ساتھ کراس پر رد عمل ظاہر نہیں کیا تھا اور وہ اچھی طرح سے محفوظ تھے۔
اس کے بعد ، RSV اور ADV recombinant پلازمیڈس کو جراثیم سے پاک پانی کا استعمال کرتے ہوئے 10 اوقات میں گھٹا دیا گیا ، اور RSV اور ADV کے لئے پتہ لگانے کی حدود 10 تھے۔6کاپیاں/ایم ایل۔
.
2. کیو پی سی آر کے ساتھ موازنہ کریں
کیو پی سی آر کے طریقہ کار کے مقابلے میں ، آر ایس وی اور ایڈ کی کھوج کی حدود 103 کاپیاں/ایم ایل ہیں
(RSV اور ADV کی QPCR کا پتہ لگانے کی حساسیت)
MIRA-CISPR کا طریقہ نچلی سطح کی لیبارٹریوں کے لئے زیادہ موزوں ہے ، جس میں مختصر پتہ لگانے کا وقت ، آسان آپریشن ، اور تجرباتی کاموں کو مکمل کرنے کے لئے بڑے پیمانے پر کیو پی سی آر آلات کی ضرورت نہیں ہے۔
3. کلینیکل نمونوں کا موازنہ
شدید سانس کے انفیکشن والے 160 بچوں سے گلے میں جھاڑو کے نمونے جمع کیے گئے تھے۔ ایک ہی وقت میں ، MIRA-CISPR طریقہ اور کیو پی سی آر کے طریقہ کار کا پتہ لگانے کے لئے استعمال کیا گیا تھا ، اور نتائج کا موازنہ کلینیکل آزمائشی نتائج سے کیا گیا تھا۔
کیو پی سی آر کے طریقہ کار کے مقابلے میں ، آر ایس وی اور ایڈ کے لئے ایم آئی آر اے سی آر ایس پی آر کے طریقہ کار کی حساسیت بالترتیب 98.1 ٪ اور 91.4 ٪ تھی ، اور پتہ لگانے کی وضاحت 1 0 0 ٪ تھی۔ کاپا کی قیمت 0.95 سے زیادہ ہے ، جو مستقل مزاجی کی اعلی ڈگری کی نشاندہی کرتی ہے۔
MIRA-CISPR کے طریقہ کار میں RSV اور ADV کی تیز ، حساس اور مخصوص کھوج کے فوائد ہیں۔ یہ وائرل انفیکشن کا فوری اور درست طریقے سے پتہ لگاسکتا ہے ، اور کم طبی وسائل والے علاقوں میں استعمال کے ل more زیادہ موزوں ہے۔