سالماتی تشخیصی ٹیکنالوجیز آج ایک غیر معمولی رفتار سے تیار ہورہی ہیں ، پچھلے دو سالوں میں نمایاں پیشرفت کے ساتھ۔ ان میں سے ، آئسوڈرمل پروردن سازی کی ٹیکنالوجیز نے خصوصی سامان کی ضرورت کے بغیر وسعت انجام دینے کی ان کی صلاحیت کی وجہ سے زیادہ توجہ حاصل کی ہے۔ کئی معروف آئسوڈرمل پروردن کے طریقے موجود ہیں ، جیسے چراغ ، آر پی اے ، اور آر اے اے۔ تاہم ، آج میں ایک نئی آئسوڈرمل امپلیفیکیشن ٹکنالوجی مائرا متعارف کرانا چاہتا ہوں۔
اس بات کو یقینی بنانے کے لئے کہ ہر ایک کو کلیدی تصورات کی مستقل تفہیم حاصل ہے ، یہاں کچھ اصطلاحی وضاحتیں ہیں۔
- ریکومبیناس پولیمریز ایمپلیفیکیشن (آر پی اے): یہ ایک ریکومبینیز ثالثی امپلیفیکیشن ٹکنالوجی ہے۔
-recombinase- ایڈڈ امپلیفیکیشن (RAA): اسی طرح کی ریکومبنیز ثالثی پروردن کا طریقہ۔
- لوپ ثالثی آئسوڈرمل امپلیفیکیشن (چراغ): ایک اور آئسوڈرمل پروردن کی تکنیک۔
۔
فوری خلاصہ اور وضاحت:
بہت سے لوگوں کو تعجب ہوسکتا ہے کہ ان میں سے کون سا مختلف آئسوڈرمل پروردن کے طریقوں میں زیادہ قابل اعتماد اور مستحکم ہے۔ حقیقت میں ، ہر ٹکنالوجی کی اپنی طاقت اور حدود ہوتی ہیں۔ تاہم ، کامیاب اپنانے کے کلیدی عوامل متنوع ایپلی کیشنز میں قابل اعتماد طریقے سے ، کم قیمت ، اور مضبوط کارکردگی کی پیمائش کرنے کی صلاحیت ہیں۔
اب میں ہر ٹکنالوجی کا مختصر طور پر تجزیہ کروں گا جس کی بنیاد پر میں جانتا ہوں:
چراغ (لوپ ثالثی آئسوڈرمل پروردن):
اس شعبے میں بہت سے لوگ جانتے ہیں کہ لیمپ کی ابتدا جاپان میں ہوئی تھی ، جسے ڈاکٹر نوٹومی نے 2000 میں ناول جین امپلیفیکیشن تکنیک کے طور پر تیار کیا تھا۔ فی الحال ، اس ٹکنالوجی کی ملکیت جاپانی کمپنی ایکن کیمیکل کمپنی ، لمیٹڈ سے تعلق رکھتی ہے۔
فوائد:
- اعلی حساسیت (روایتی پی سی آر طریقوں سے زیادہ وسعت کے 2-5 کے آرڈر)۔
- مختصر رد عمل کا وقت (رد عمل 30-60 منٹ میں مکمل کیا جاسکتا ہے)۔
- کلینیکل استعمال میں خصوصی آلات کی ضرورت نہیں ہے (اگرچہ کٹ کی نشوونما کے دوران ریئل ٹائم ٹربائڈیمٹر کی سفارش کی جاتی ہے)۔
- کام کرنے میں آسان (چاہے ڈی این اے یا آر این اے کا پتہ لگائیں ، اس عمل میں رد عمل کے حل ، خامروں اور ٹیمپلیٹ کو رد عمل ٹیوب میں ملا دینا شامل ہے ، پھر پانی کے غسل میں یا انکیوبیٹر میں 30-60 منٹ کے لئے تقریبا 63 63 ڈگری پر انکیوبیٹنگ ، نیک آنکھ کے ذریعہ قابل مشاہدہ)۔
نقصانات:
- اعلی حساسیت کے نتیجے میں ایک بار ٹیوب کھولی جانے کے بعد ایروسول آلودگی کا نتیجہ ہوسکتا ہے ، جس سے یہ جھوٹے مثبت کے زیادہ خطرہ کی وجہ سے پی سی آر لیبارٹری کے باہر استعمال کے ل it نا مناسب ہوجاتا ہے۔
- پرائمر ڈیزائن مشکل ہے ، جس سے کچھ بیماریوں کے ل it یہ نا مناسب ہے ، خاص طور پر وہ جو کچھ عام سلسلوں کے ساتھ وائرس کی وجہ سے ہوا ہے۔
- اس کی درخواست نسبتا limited محدود ہے۔
آر پی اے اور آر اے اے آئسوڈرمل امپلیفیکیشن ٹیکنالوجیز:
یہ دونوں طریقے بڑے پیمانے پر ہم جنس ہیں ، جس میں بنیادی فرق دوبارہ استعمال ہونے والے ریکومبینیز کا ذریعہ ہے۔
- آر پی اے کا ریکومبناس ٹی 4 بیکٹیریوفیج سے آتا ہے۔
- RAA کا recombinase بیکٹیریا یا کوکیوں سے اخذ کیا گیا ہے۔
کام کرنے کے اصول کے کلیدی نکات:
1. اے ٹی پی کی موجودگی میں ، ریکومبینیز پرائمر سے منسلک ہوتی ہے ، جس سے پروٹین نیوکلیک ایسڈ کمپلیکس تشکیل ہوتا ہے ، جو اس کے بعد ہدف ڈی این اے سے ملاپ کی تلاش کرتا ہے۔
2. ایک بار جب پرائمر ملاپ والے ڈی این اے ٹیمپلیٹ کو تلاش کرتا ہے تو ، اے ٹی پی ہائیڈولیسس پرائمر چھوڑنے کے لئے ریکومبینیز کے ل the توانائی فراہم کرتا ہے ، اور ڈی این اے پولیمریز ایک نیا ڈی این اے اسٹینڈ کی ترکیب کرتا ہے۔
3. ایک ہی وقت میں ، سنگل پھنسے ہوئے ڈی این اے بائنڈنگ پروٹین (ایس ایس بی) ڈبل اسٹرینڈ کی اصلاح کو روکنے کے لئے بے گھر ہونے والے ڈی این اے اسٹرینڈ کا پابند ہیں۔
فوائد:
- آر پی اے/آر اے اے کا رد عمل بہت تیز ہے ، جس کے نتائج تقریبا 30 30 منٹ میں قابل حصول ہیں۔
- حساسیت 10 کاپیاں/μl تک پہنچ سکتی ہے۔
- پرورش کے دوران پیچیدہ آلات کی ضرورت نہیں۔
-تحقیقات پر مبنی یا کولائیڈیل گولڈ کرومیٹوگرافی طریقوں کی مزید ترقی نتائج کی ترجمانی کو بہت آسان بناتی ہے ، جس سے وہ وسائل سے محدود یا معاشی طور پر پسماندہ علاقوں میں استعمال کے ل well مناسب ہیں۔
نقصانات:
- آر پی اے ایک ایسی ٹیکنالوجی ہے جو برطانوی کمپنی ٹی ڈبلیو آئی ایس ٹی ڈی ایکس نے تیار کی ہے ، جو اب ایبٹ کی ملکیت ہے ، جس کے نتیجے میں زیادہ لاگت ، طویل فراہمی کے چکر ، اور تکنیکی مدد کی کمی ہے۔ اس سے چین میں بڑے پیمانے پر اطلاق اور بڑے پیمانے پر پیداوار مشکل ہوجاتی ہے۔
- RAA ایک مکمل طور پر گھریلو ٹیکنالوجی ہے ، لیکن اس میں مداخلت کی مزاحمت اور پروڈکٹ ری ایجنٹ مستقل مزاجی کے لحاظ سے استحکام کا فقدان ہے۔ مزید یہ کہ فنکشنل خامروں کے لئے مینوفیکچرنگ کے عمل میں بہتری کی ضرورت ہے۔ اگرچہ یہ ٹیکنالوجی پانچ سالوں سے مارکیٹ میں ہے ، لیکن استحکام اور استعداد کے امور کی وجہ سے ابھی تک اسے وسیع پیمانے پر اپنایا نہیں گیا ہے۔
- آر پی اے اور آر اے اے دونوں کو پرائمر کی ضرورت ہوتی ہے جو لمبائی میں 30-35 بی پی ہیں۔ چھوٹے پرائمر مخصوصیت ، حساسیت ، اور پرورش کی رفتار کو متاثر کرتے ہیں ، جس سے پرائمر ڈیزائن کو مشکل بناتا ہے۔
میرا (ملٹی اینزیم آئسوڈرمل ریپڈ امپلیفیکیشن):
میرا ایک ناول آئسوڈرمل امپلیفیکیشن ٹکنالوجی ہے جو وسط -2019 میں متعارف کرایا گیا ہے۔ یہ آر پی اے اور آر اے اے کے لئے ہم جنس ہے۔
اگرچہ میرا کام کرنے والے اصولوں کے لحاظ سے آر پی اے اور آر اے اے کے ساتھ مماثلت رکھتا ہے ، لیکن انزائم کے انتخاب ، کاشت ، طہارت ، اور بڑے پیمانے پر پیداوار کے دیگر پہلوؤں میں نمایاں فرق موجود ہیں۔ مزید یہ کہ ، میرا کے ڈویلپر ، ایمپفچر کے پیچھے تکنیکی ٹیم نے اس ٹیکنالوجی کو مکمل کرنے میں تقریبا 11 11 سال گزارے ہیں۔ اب یہ استعمال میں استعمال ہونے والے ریجنٹس ، کسٹم ڈویلپمنٹ ، تحقیقی منصوبوں اور دیگر حسب ضرورت خدمات کی ترقی کی حمایت کرنے کے لئے پوری طرح سے لیس ہے۔
فوائد:
1. میرا ریجنٹس میں فنکشنل پروٹین مختلف انزائموں سے حاصل کیے جاتے ہیں ، جس میں کچھ انزائمز کو کور انزائم سسٹم کی کارکردگی کو بڑھانے کے لئے ہدف میں ترمیم کی جاتی ہے ، جس کے نتیجے میں زیادہ جامع نظام ہوتا ہے۔
2. مضبوط مداخلت کی مزاحمت اور استحکام۔ میرا ریجنٹس کوفیکٹر کے انتخاب اور حراستی کے لحاظ سے وسیع پیمانے پر اصلاح سے گزرتے ہیں ، اس کے ساتھ ساتھ منجمد خشک کرنے والی پیداوار کے عمل بھی ان کی مداخلت سے زیادہ مزاحم اور زیادہ مستحکم ہوجاتے ہیں۔
3. تخصیص اور استعداد۔ فنکشنل پروٹینوں کی تیاری اور ٹکنالوجی کی گہری تفہیم پر مکمل کنٹرول کی وجہ سے ، میرا کو مختلف ایپلی کیشنز کے مطابق ڈھال لیا جاسکتا ہے ، جس میں مختلف ریجنٹ سسٹم اور ذاتی نوعیت کی حسب ضرورت خدمات پیش کی جاسکتی ہیں۔
4. ملکیتی پیٹنٹ۔ چونکہ میرا 100 ٪ گھریلو طور پر تیار ہوا ہے ، لہذا مصنوعات کی ترقی کے دوران پیٹنٹ کی خلاف ورزی کا کوئی خطرہ نہیں ہے۔ اس سے میرا کو گھریلو اور بین الاقوامی منڈیوں میں مسابقتی فائدہ ملتا ہے۔
5. ایک مکمل پروڈکشن پروٹوکول قائم کیا گیا ہے ، جس سے مستحکم بڑے پیمانے پر پیداوار کی اجازت دی جاسکتی ہے۔
نقصانات:
1۔ مارکیٹ کی پہچان ابھی بھی کم ہے ، اور وسیع تر قبولیت حاصل کرنے کے لئے مختلف شعبوں (جیسے مختلف علاقوں میں مثبت شرحوں) کے مزید اعداد و شمار اور حوالہ جات کی ضرورت ہے۔
2. پرائمر ڈیزائن اب بھی آر پی اے یا آر اے اے کی خصوصیات کی پیروی کرتا ہے ، جس میں طویل پرائمر یا تحقیقات کی ترتیب کی ضرورت ہوتی ہے ، جو موجودہ پی سی آر صارفین کے لئے فوری سوئچ میں آسانی نہیں رکھ سکتی ہے۔