میرا ڈی این اے آئسوڈرمل ریپڈ امپلیفیکیشن کٹ فلوروسینس

میرا ڈی این اے آئسوڈرمل ریپڈیمیفیکیشن کٹ کمرے کے درجہ حرارت اور مستقل درجہ حرارت (عام طور پر 39ºC سے 42ºC سے 42ºC) دونوں پر جدید نیوکلیک ایسڈ امپلیفیکیشن ٹکنالوجی کا استعمال کرتی ہے۔ معاون پروٹین اور سنگل اسٹرینڈ بائنڈنگ پروٹین کی مدد سے ، ریکومبیناس اور پرائمر ایک ایسا پیچیدہ تشکیل دیتے ہیں جو تلاش کرتا ہے اور ہدف ہومولوجی ڈومین سے منسلک ہوتا ہے۔ اس کے نتیجے میں ہومولوگس سائٹ پر ڈی لوپ خطے کی تشکیل ہوتی ہے ، جس سے اسٹرینڈ ایکسچینج کا آغاز ہوتا ہے۔ چونکہ ریکومبینیز کمپلیکس سے الگ ہوجاتا ہے ، پولیمریز پرائمر کے 3 'اختتام سے منسلک ہوتا ہے ، جس سے چین کی توسیع کے عمل کا آغاز ہوتا ہے۔ مزید برآں ، ایکونوکلیز سرگرمی کا فائدہ اٹھا کر ، کٹ ٹیمپلیٹ کے لئے ڈیزائن کردہ مخصوص سالماتی تحقیقات کا استعمال کرتی ہے ، جس سے فلوروسینس کا پتہ لگانے کے سامان کے ذریعہ ٹارگٹ فریگمنٹ ایمپلیفیکیشن عمل کی اصل وقت کی نگرانی کی جاسکتی ہے۔.

زیادہ سے زیادہ کارکردگی کے لئے ، پرائمر لمبائی میں 30-35 bp ہونا چاہئے۔ مختصر پرائمر پرورش کی رفتار اور پتہ لگانے کی حساسیت کو کم کرسکتے ہیں۔ پرائمر ڈیزائنوں کو ثانوی ڈھانچے سے پرہیز کرنا چاہئے جو وسعت میں رکاوٹ پیدا کرسکتے ہیں۔ تجویز کردہ امپلیکن کی لمبائی 150-300 bp ہے۔

فلوروسینٹ تحقیقات کو مخصوص پرائمر کی شناخت سائٹ کے ساتھ اوورلیپ نہیں ہونا چاہئے۔ یہ لمبائی میں 46-52 nt ہونا چاہئے ، پیلنڈرومک سلسلوں ، داخلی ثانوی ڈھانچے اور مسلسل بار بار اڈوں سے پرہیز کرتے ہیں۔ تحقیقات کے ڈیزائن میں چار ترمیمی سائٹیں شامل ہیں:

• A dspacer۔
• A فلورسنٹ گروپTHF سائٹ کے اوپر کا لیبل لگا ہوا ہے۔
• A بجھانے والا گروپفلوروسینٹ گروپ کے علاوہ بہاو ، 2-4 nt ہے۔
• تحقیقات کے 3 'اختتام پر ایک کے ساتھ لیبل لگا ہوا ہےمسدود کرنے والا گروپ(جیسے ، ایک امائن گروپ ، فاسفیٹ گروپ ، یا C 3- اسپیسر) ، جس میں 3 'اختتام سے تقریبا 15 nt دور ہے۔

• وضاحتیں: 48 ٹی/پیک

ڈاؤن لوڈ، اتارنا ٹیگ: میرا ڈی این اے آئسوڈرمل ریپڈیمیفیکیشن کٹ فلوروسینس ، چائنا میرا میرا ڈی این اے آئسوڈرمل ریپڈ ایمپلیفیکیشن کٹ فلوروسینس مینوفیکچررز ، سپلائرز